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NEWS病理染色实验中的组织固定注意事项 | 918博天娱乐官网分享
来源:水希国 日期:2025-03-23病理学技术是医疗诊断的重要基础,其发展直接影响着病理诊断学的进步。最早的诊断通常集中在形态学、组织学及生化的层面,而病理学作为一门研究疾病发生与发展的学科,主要探讨疾病过程中组织和细胞的代谢、功能及结构变化。在生物医学领域,组织处理的前期准备对于染色结果至关重要,涉及取材、固定、脱水、透明处理、浸润、包埋及切片等多个环节。
组织取材与固定的注意事项: 1. 取材时应选择新鲜、适中大小的组织块,尽量避免挤压导致变形,以保持组织的原有形态和清洁,推荐的组织块尺寸为不超过2×15×0.3cm。 2. 固定是关键步骤,通常使用10%甲醛溶液或其他固定液(如Carnoy固定液),固定时间依据组织块大小而定,通常不超过24小时,以避免组织自溶或腐腐败。 3. 固定液的选择对后续的染色效果具有显著影响,例如Bouin's固定液适合那些对染色效果要求较高的组织样本。
组织固定的目的: 1. 破坏细胞内的溶酶体酶:组织离体后,细胞失去氧气供应死亡,若未及时固定,溶酶体酶会释放并导致组织自溶。 2. 杀死外来细菌:离体组织若不及时固定,将可能成为细菌滋生的良好培养基,促使组织腐坏。 3. 尽可能保持活细胞时的原状:固定可以保留细胞的微细结构及含物,确保观察时的准确性。 4. 凝固和沉淀细胞内原有的产物:在固定过程中,确保细胞成分的不溶性以利后续染色。 5. 维持组织的硬度和弹性,避免后续处理步骤中的扭曲和变形。 6. 使不同细胞及其成分产生不同的折光率,有助于染色后结构的辨识。 7. 对组织的分析性染色起到媒染作用,尤其是使用Bouin's固定液时,可以使结缔组织染色更为鲜艳。 8. 保存细胞内抗原性,利于免疫组化染色时抗原与抗体的结合反应。
组织固定的注意事项: 1. 固定的及时性:组织离体后需在1小时内立即固定。 2. 固定液的选择:根据实验需求选择合适的固定液。 3. 固定液用量:应达到组织体积的4-10倍。 4. 固定液浓度:浓度应准确,避免过稀或过浓影响结果。 5. 固定温度:应在室温或35-37℃的全封闭组织处理机内进行,高温会加速自溶和细胞收缩,破坏抗原及DNA。 6. 固定时间:新鲜标本应在剖开后固定12-24小时,取材后的大标本需在室温下再固定4-6小时,小标本则需3-4小时,新鲜小标本应固定4-8小时。 7. 针对分子病理的标本,固定总时间宜控制在24小时内,同时不少于6小时,确保厚度控制在2mm。
Bouin's固定液的应用: Bouin's固定液(产品编号:BL-G016)主要成分为PA、甲醛及乙酸,广泛应用于细胞和组织的固定,利于后续的观察与分析,特别适用于免疫组化以及胚胎学研究等。此外,在研究鸡法氏囊的显微结构时,也采用Bouin's固定液进行光学显微镜观察,以节省人力和物力资源。 通过使用918博天娱乐官网的产品,将强化病理学和生物医学领域的研究成果,确保诊断的准确性和可信度。
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